Anticuerpos neutralizantes contra pan-sarbecovirus en supervivientes del SARS-CoV-1 inmunizados con BNT162b2
Anticuerpos neutralizantes contra pan-sarbecovirus en supervivientes del SARS-CoV-1 inmunizados con BNT162b2
Chee-Wah Tan, Ph.D. / Wan-Ni Chia, Ph.D. / Barnaby E. Young, M.R.C.P. / Feng Zhu, Ph.D. / Beng-Lee Lim, M.Sc. / Wan-Rong Sia, B.S. / Tun-Linn Thein, M.P.H. / Mark I.-C. Chen, Ph.D. / Yee-Sin Leo, F.R.C.P. / David C. Lye, F.R.C.P. / Lin-Fa Wang, Ph.D.
Resumen
Las variantes preocupantes del síndrome respiratorio agudo
emergente del coronavirus 2 (SARS-CoV-2) plantean un desafío para la
eficacia de las vacunas actuales. Sería ideal una vacuna que pudiera
prevenir la infección causada por variantes de interés conocidas y
futuras, así como la infección por sarbecovirus preemergentes (es decir,
aquellos con potencial para causar enfermedades en humanos en el
futuro). Aquí proporcionamos datos que muestran que se inducen potentes
anticuerpos neutralizantes de pan-sarbecovirus de clado cruzado en
sobrevivientes de la infección por coronavirus 1 (SARS-CoV-1) del
síndrome respiratorio agudo severo que han sido inmunizados con la
vacuna de ARN mensajero (ARNm) BNT162b2. Los anticuerpos son de alto
nivel y amplio espectro, capaces de neutralizar no solo las variantes
conocidas de preocupación, sino también los sarbecovirus que se han
identificado en murciélagos y pangolines y que tienen el potencial de
causar una infección humana. Estos hallazgos muestran la viabilidad de
una estrategia de vacuna contra el pan-sarbecovirus. (Financiado por la
Fundación Nacional de Investigación de Singapur y el Consejo Nacional de
Investigación Médica).
La pandemia de la enfermedad por coronavirus 2019 (Covid-19) que comenzó
en diciembre de 2019 es causada por el SARS-CoV-2 (1). El SARS-CoV-2
comparte una identidad de secuencia genómica general de aproximadamente
el 80% con el SARS-CoV (denominado aquí como SARS-CoV-1 para evitar
confusiones). El SARS-CoV-1 fue responsable del brote de SARS en
2002-2003, que incluyó más de 8000 infecciones y más de 700 muertes en
todo el mundo (2).
El SARS-CoV-1 y el SARS-CoV-2 pertenecen a la especie coronavirus
relacionado con el SARS (subgénero sarbecovirus, género betacoronavirus) (3). Antigénicamente, los dos coronavirus se colocan en dos clados
filogenéticos distintos (1,4); las muestras de suero convalecientes de
pacientes con SARS o Covid-19 carecen de neutralización cruzada (5), a
pesar de que la mayoría de los sobrevivientes de la infección por
SARS-CoV-1 continúan teniendo anticuerpos neutralizantes detectables
contra el virus homólogo del SARS-CoV-1 17 años después de la
infección (5).
En este estudio, investigamos la posibilidad de un refuerzo cruzado de
anticuerpos neutralizantes de amplio espectro en supervivientes de la
infección por SARS-CoV-1 en Singapur que habían recibido la vacuna de
ARNm BNT162b2 (Pfizer-BioNTech) contra el SARS-CoV-2.
Métodos
-Muestras de suero
En este estudio se incluyeron cinco paneles de sueros. El panel de
pacientes con SARS-CoV-1 consistió en muestras de suero obtenidas de 10
sobrevivientes de la infección por SARS-CoV-1 en Singapur en diferentes
momentos (2012 y 2020) antes de que comenzara el programa de vacunación
en enero de 2021. El panel de pacientes de SARS-CoV-2 consistió en 10
muestras de suero obtenidas de pacientes con infección por SARS-CoV-2
durante 2020 como parte de un estudio longitudinal nacional. El panel de
vacunados sanos consistió en 10 muestras de suero obtenidas el día 14
después de la segunda dosis de la vacuna de ARNm BNT162b2, lo que
equivale a 35 días después de la primera dosis. El panel vacunado contra
el SARS-CoV-2 consistió en 10 muestras de suero obtenidas de
sobrevivientes de Covid-19 que habían recibido dos dosis de la vacuna
BNT162b2. El panel vacunado contra el SARS-CoV-1 consistió en 8 muestras
de suero obtenidas de supervivientes de la infección por el SARS-CoV-1
entre 21 y 62 días después de la primera vacunación con BNT162b2; 4 de
las 8 muestras se obtuvieron de pacientes cuyo suero estaba en el panel
de pacientes con SARS-CoV-1. Se obtuvo el consentimiento informado por
escrito de todos los pacientes cuyo suero se incluyó en el estudio, y se
obtuvo la aprobación ética del National Healthcare Group y la National
University of Singapore. Los autores dan fe de la exactitud e integridad
de los datos presentados en este informe.
-Pruebas de neutralización de virus sustitutos
En este estudio se utilizaron dos métodos diferentes para realizar
pruebas de neutralización de virus sustitutos (sVNT). Los sVNTs
singleplex para SARS-CoV-1 y SARS-CoV-2 se han descrito anteriormente (6) y
se describen brevemente en la sección Métodos del Apéndice
complementario, disponible con el texto completo de este artículo en
NEJM.org. El kit sVNT para el SARS-CoV-2 se comercializó con el nombre
comercial cPass (GenScript), con la autorización de uso de emergencia de
la Foods and Drugs Administration otorgada en noviembre de
2020.
Para los sVNT multiplex, adaptamos el sVNT utilizando la plataforma
Luminex como se describió anteriormente (7) (consulte la sección Métodos del
Apéndice complementario). Se preincubaron microesferas revestidas con
RBD (600 perlas por antígeno) con suero a una dilución final de 1:20 o
mayor durante 1 hora a 37º C con agitación de 800 rpm. Después de 1 hora
de incubación, se añadieron al pocillo 50 μl de enzima convertidora de
angiotensina humana 2 (ACE2) conjugada con ficoeritrina (PE) (hACE2; 1
μg por mililitro; GenScript) y se incubó durante 30 minutos a 37° C con
agitación, seguido de dos lavados con albúmina de suero bovino al 1%
en solución salina tamponada con fosfato (PBS). Las lecturas finales se
adquirieron con el uso del sistema MAGPIX (Luminex).
-Perfilado de células B
Para el análisis de citometría de flujo, se descongelaron células
mononucleares de sangre periférica criopreservadas y se tiñó la
superficie para detectar células B específicas del SARS-CoV-1 y
específicas del SARS-CoV-2 con el uso de tetrámeros de cebo RBD
(consulte la sección Métodos del Apéndice complementario). En resumen,
las células mononucleares de sangre periférica descongeladas se
incubaron durante 40 minutos a temperatura ambiente con tetrámeros de
SARS-CoV-1 RBD y tetrámeros de SARS-CoV-2 RBD con suero bovino fetal al
10% (FBS) en clasificación de células activadas por fluorescencia (FACS)
tampón de tinción (PBS suplementado con EDTA [2 mmol por litro] y FBS
al 2%), después de lo cual se realizó la tinción con anticuerpos
conjugados con fluorocromo de panel de superficie. La tinción de la
superficie se realizó con tinte de viabilidad (LIVE / DEAD Fixable Aqua
Dead Cell Stain [Invitrogen]), anticuerpo anti-CD3 humano conjugado con
isotiocianato de fluoresceína (FITC), anticuerpo anti-CD14 humano
conjugado con FITC, anticuerpo anti-CD56 humano conjugado con FITC,
anticuerpo anti-CD19 humano conjugado con PE-Cy5, anticuerpo anti-CD27
humano conjugado con APC-H7 y anticuerpo anti-CD38 humano conjugado con
BV786 durante 30 minutos en tampón de tinción FACS a 4° C. Las células
teñidas se lavaron dos veces con tampón de tinción FACS y se adquirieron
el mismo día. Las muestras se adquirieron en un analizador BD
LSRFortessa o BD FACSAria III (BD Biosciences) equipado con láseres de
355 nm, 405 nm, 488 nm, 561 nm y 640 nm. Las células B específicas de
SARS-CoV-1 y las células B específicas de SARS-CoV-2 se cuantificaron
mediante la activación de células B CD19+ después de excluir las
células Aqua-positivas (muertas) y las células CD3+, CD14+ y CD56+.
-Análisis estadístico
El procesamiento y análisis de datos se realizó con el software R,
versión 4.0.2 (R Project for Statistical Computing) con el paquete
Tidyverse, versión 1.3.0. Las variables continuas se compararon entre el
grupo de referencia y el grupo de comparación con el uso de pruebas de
rango con signo de Wilcoxon. Todas las pruebas fueron de dos caras y se
consideró que un valor de p menor de 0,05 indicaba significación
estadística. Los diagramas de caja y los diagramas de dispersión se
generaron con el paquete ggplot2 en el software R, versión 3.3.2. Se
ajustó un modelo lineal binomial para examinar la relación entre la
inhibición de la interacción ACE2-RBD y la concentración de anticuerpos
monoclonales contra pan-sarbecovirus.
Resultados
-Potenciación de anticuerpos neutralizantes contra el SARS-CoV-1 después de la vacunación contra el SARS-CoV-2
Para examinar si las personas que han estado previamente expuestas al
sarbecovirus en un clado pueden tener un refuerzo de anticuerpos
neutralizantes de pan-sarbecovirus amplio mediante la vacunación con la
proteína pico (S) del sarbecovirus de un clado diferente, evaluamos ocho
sobrevivientes infectados con SARS-CoV-1 en Singapur para neutralizar los
anticuerpos contra el SARS-CoV-1 y el SARS-CoV-2.
Para las comparaciones cuantitativas de anticuerpos neutralizantes,
utilizamos la plataforma sVNT que nuestro grupo había desarrollado
previamente, que tiene una buena concordancia con la prueba de
neutralización de virus vivos (6,8). Antes de la vacunación, los
sobrevivientes de la infección por SARS-CoV-1 tenían anticuerpos
neutralizantes detectables contra el SARS-CoV-1, pero nulos o solo
niveles bajos de anticuerpos neutralizantes anti-SARS-CoV-2 (Tabla S1 en
el Apéndice complementario). Después de recibir dos dosis de la vacuna
de ARNm BNT162b2, los ocho participantes tenían niveles altos de
anticuerpos neutralizantes contra el SARS-CoV-1 y el SARS-CoV-2. Los
participantes 1 y 4, cuyas muestras de suero se habían obtenido después
de recibir una dosis única de la vacuna de ARNm, mostraron una
inhibición por saturación (100%) contra el SARS-CoV-2, un nivel similar
al de los otros seis participantes, que habían recibido dos dosis.
También se observó un refuerzo uniforme de los anticuerpos
neutralizantes anti-SARS-CoV-1, independientemente del nivel basal antes
de la vacunación.
-Neutralización cruzada de anticuerpos contra diferentes sarbecovirus
Luego examinamos la amplitud de la neutralización cruzada de anticuerpos
contra 10 sarbecovirus diferentes: 7 del clado SARS-CoV-2 (la cepa
original de SARS-CoV-2; variantes de SARS-CoV-2 de interés B.1.1.7 [o
alpha] (9), B.1.351 [o beta] (10), y B.1.617.2 [o delta] (11); coronavirus de
murciélago RaTG13 (1); y coronavirus de pangolín GD-1 (12) y GX-P5L (12) y 3 del
clado SARS-CoV-1 [SARS-CoV-1, bat WIV1 (13), y bat RsSHC014 (13)]. Estos
virus se eligieron sobre la base de su amplia representación del
espectro filogenético RBD de sarbecovirus conocido (Fig. S1). Para
lograr una comparación lado a lado más precisa y reproducible de los
niveles de anticuerpos neutralizantes, modificamos el sVNT original
adaptándolo a la plataforma Luminex para lograr multiplexidad.
Figura 1. Impulso de anticuerpos neutralizantes de panesarbecovirus de clados cruzados
El panel A muestra el análisis de la prueba de neutralización de virus
sustituto múltiple (sVNT) de cinco paneles de muestras de suero humano
contra 10 sarbecovirus diferentes. Todo el suero se utilizó a una
dilución de 1:20. Se estableció un límite del 30% como se determinó
previamente. El síndrome respiratorio agudo severo coronavirus 2
(SARS-CoV-2) se utilizó como referencia para la comparación. Los paneles
de suero fueron los siguientes: paciente con SARS-CoV-1, muestras de
suero de supervivientes de la infección por SARS-CoV-1; paciente con SARS-CoV-2, muestras de suero obtenidas durante 2020 de pacientes con
infección por SARS-CoV-2; muestras de suero vacunadas sanas obtenidas de
personas sanas el día 14 después de la segunda dosis de la vacuna de
ARN mensajero BNT162b2; Muestras de suero vacunadas contra el SARS-CoV-2
obtenidas de sobrevivientes de Covid-19 que habían recibido dos dosis
de la vacuna BNT162b2; y muestras de suero vacunadas contra el
SARS-CoV-1 obtenidas de supervivientes de la infección por el SARS-CoV-1
entre 21 y 62 días después de la primera dosis de la vacuna BNT162b2.
El panel B muestra la titulación de anticuerpos neutralizantes
expresados como el título de neutralización al 50% (NT50) con el uso
de los mismos paneles de suero y virus que en el panel A. Las muestras
se analizaron a diluciones de 1:20 a 1: 20,480 mediante titulación en
serie. El panel vacunado contra el SARS-CoV-1 se utilizó como grupo de
referencia. Un límite de 1:100 se indica mediante la línea
discontinua. El panel C muestra gráficos de citometría de flujo
representativos para el panel vacunado contra el SRAS-CoV-1 (5
muestras), el panel vacunado sano (6 muestras) y el panel vacunado
contra el SRAS-CoV-2 (5 muestras), indicando la frecuencia de células
positivas tanto para SARS-CoV-1 como para SARS-CoV-2. El panel D muestra
una gráfica de la frecuencia de células positivas para SARS-CoV-1 y
SARS-CoV-2 entre todas las células positivas para SARS-CoV-1 o positivas
para SARS-CoV-2. El panel vacunado contra el SARS-CoV-1 se utilizó como
grupo de referencia. Los diagramas de caja (paneles A, B y D) muestran
todos los puntos de datos; los bigotes indican el rango, la parte
superior e inferior de cada cuadro los percentiles 75 y 25, y la línea
horizontal dentro de cada cuadro el percentil 50. La significancia se
determinó con una prueba de rango con signo de Wilcoxon. Los valores de P
se indican encima de cada gráfico. Se consideró que un valor de p
inferior a 0,05 indicaba significación estadística. Los virus del clado
SARS-CoV-1 están sombreados en gris en los Paneles A y B.
Como se muestra en la Figura 1A, el panel de sueros vacunados contra el
SARS-CoV-1 fue el único grupo con un amplio espectro de anticuerpos
neutralizantes contra los 10 sarbecovirus, mientras que los otros cuatro
paneles de sueros mostraron un claro gradiente de niveles de
anticuerpos neutralizantes, con el más alto dirigirse al virus homólogo
de exposición o vacunación. Debido a que el ensayo se realizó con una
dilución fija de 1:20 para todas las muestras de suero, el panel
vacunado con SARS-CoV-1 mostró una neutralización cercana a la
saturación para todas las muestras contra los 10 virus.
Para comparar mejor los títulos de anticuerpos neutralizantes para los
diferentes paneles de suero, el título de neutralización al 50% se
determinó mediante dilución en serie (Figura 1B). Este análisis confirmó
que el panel vacunado contra el SARS-CoV-1 fue el único que mostró
verdaderos anticuerpos neutralizantes del pan-sarbecovirus contra todos
los virus examinados en este estudio. Aunque el panel vacunado contra el
SARS-CoV-2 mostró niveles mejorados de anticuerpos neutralizantes
contra los virus en el clado del SARS-CoV-2, el nivel de anticuerpos
neutralizantes contra los virus en el clado del SARS-CoV-1 fue aún
significativamente más bajo que en el Panel vacunado contra el
SARS-CoV-1.
-Efecto de Cross-Clade Prime y Boost
Planteamos la hipótesis de que los anticuerpos neutralizantes del
pan-sarbecovirus observados en las muestras de suero vacunadas contra el
SARS-CoV-1 eran el resultado del enriquecimiento de anticuerpos
neutralizantes de reacción cruzada de una cepa cruzada (infección) y un
refuerzo (vacunación). Para probar esta hipótesis, utilizamos dos
enfoques diferentes. En primer lugar, realizamos un estudio de
competición utilizando el anticuerpo monoclonal 5B7D7, que se sabe que
se une a los 10 RBD y es capaz de neutralizar los 10 sarbecovirus (Fig.
S2A). Los datos mostrados en la Fig. S2B indican claramente que el panel
vacunado contra el SARS-CoV-1 es el único grupo de muestras de suero
que mantuvo un alto nivel de inhibición contra todos los virus, lo que
confirma los hallazgos mostrados en las Figuras 1A y 1B. Además, la
potenciación de los anticuerpos neutralizantes de reacción cruzada en
las muestras de suero vacunadas contra el SARS-CoV-1 se confirmó aún más
mediante la tinción directa de las células B con el uso de proteínas
RBD específicas del virus. Como se muestra en la Figura 1C y 1D, las
células B teñidas doble (es decir, las células B que se unen a los RBD
tanto del SARS-CoV-1 como del SARS-CoV-2) se enriquecieron
significativamente en el panel vacunado contra el SARS-CoV-1 como en
comparación con los paneles de pacientes sanos y vacunados contra el
SARS-CoV-2.
Discusión
En las últimas dos décadas, hemos tenido tres brotes importantes de
enfermedades infecciosas humanas causadas por coronavirus zoonóticos:
SARS en 2002-2003, síndrome respiratorio de Oriente Medio (MERS) desde
2012 y Covid-19 desde diciembre de 2019 (14). Los tres brotes causaron
devastadores pérdidas humanas y económicas en todo el mundo. Para el
coronavirus SARS-CoV-1 y MERS, todavía no tenemos una vacuna autorizada.
Para el SARS-CoV-2, la velocidad sin precedentes del desarrollo de la
vacuna ha dado como resultado varias vacunas autorizadas para la
vacunación masiva en humanos (15).
La reciente aparición de variantes del SARS-CoV-2 que pueden evadir
parcialmente la respuesta inmune a las vacunas que se basan en la cepa
del virus original (16-18) aumenta la necesidad de una vacuna contra el
coronavirus de segunda generación que proteja contra la infección para todas las conocidas y futuras variantes del SARS-CoV-2. Se están
realizando esfuerzos para desarrollar una vacuna de este tipo (19).
Sin embargo, una vacuna "de ensueño" cubriría no solo el SARS-CoV-2 y
sus variantes conocidas de preocupación, sino también futuras variantes
de preocupación y otros coronavirus con potencial conocido de causar
enfermedades humanas graves en el futuro (20), muy probablemente del
género betacoronavirus (3). Aunque se han hecho llamamientos para
desarrollar vacunas contra el pan-betacoronavirus o el pan-coronavirus (20), un objetivo más realista y urgente es una vacuna contra el
pan-sarbecovirus o una vacuna contra el coronavirus de tercera
generación. Primero, dada su alta transmisibilidad en humanos, los
sarbecovirus presentan un riesgo más alto que los otros coronavirus
zoonóticos no sarbecovirus, a pesar de que el MERS tiene la tasa de
letalidad más alta entre las enfermedades causadas por estos virus (14). En
segundo lugar, todos los sarbecovirus zoonóticos identificados hasta la
fecha utilizan hACE2 como receptor de entrada, lo que garantiza una
mayor probabilidad de éxito en la generación de una vacuna contra el
pan-sarbecovirus al inducir anticuerpos neutralizantes cruzados que
bloquean la interacción común entre hACE2 y virus. Un estudio de
mutagénesis profunda de varios RBD de sarbecovirus indicó limitaciones
mutacionales en el plegamiento y la unión de ACE2 (4). Estas limitaciones
pueden explicar la existencia de epítopos neutralizadores de clado
cruzado altamente conservados, pero no inmunodominantes, en los RBD de
sarbecovirus. Este hallazgo también apunta a un posible candidato a
vacuna contra el pan-sarbecovirus que inducirá fuertes anticuerpos
neutralizantes de clado cruzado dirigidos a los epítopos más conservados
que desempeñan un papel en la neutralización del virus, ya sea que
estén ubicados dentro o fuera de la interfaz directa RBD-ACE2 (4).
Los hallazgos del estudio actual mostraron la inducción eficiente de
anticuerpos neutralizantes de pan-sarbecovirus de alto nivel y de amplio
espectro que pueden neutralizar todas las variantes de interés y cinco
sarbecovirus preemergentes. Nuestros hallazgos mostraron la viabilidad
de lograr la neutralización del pan-sarbecovirus a través del refuerzo
de clados cruzados. Estudios anteriores han proporcionado datos de
prueba de concepto para una vacuna contra el pan-sarbecovirus en
estudios en animales (21-23). En comparación, nuestro estudio mostró un
aumento de los anticuerpos neutralizantes del pan-sarbecovirus en
humanos que fue más uniforme y más fuerte que el observado en animales.
Un nivel tan alto de refuerzo de anticuerpos neutralizantes de
pan-sarbecovirus puede lograrse con una vacuna de refuerzo cruzada de
dosis única, como se indica con el suero de dos de los ocho
participantes de nuestro estudio.
El sVNT multiplex recientemente desarrollado que se utiliza en este
estudio puede desempeñar un papel fundamental en los estudios que
requieren una comparación exacta de los niveles de anticuerpos
neutralizantes contra diferentes virus. Esto es especialmente importante
cuando no todos los virus vivos están disponibles, como es el caso del
coronavirus de murciélago RaTG13 (1), los coronavirus de murciélago WIV1 y
RsSHC014 (13), y los coronavirus de pangolín GD-1 y GX-P5L (12). Sí existen
regiones RBD (24), múltiples estudios han demostrado que para los
sarbecovirus, la mayoría de los anticuerpos neutralizantes se dirigen al
RBD inmunodominante (4,25). Estudios previos han indicado que el sVNT
basado en RBD tiene una alta concordancia con las pruebas de
neutralización basadas en virus vivos (5,8). Hemos proporcionado más datos
sobre la concordancia entre el sVNT y una prueba de neutralización de
virus pseudotipados para tres sarbecovirus seleccionados (consulte el
Apéndice complementario).
Los datos actuales en humanos se obtuvieron de supervivientes de la
infección por SARS-CoV-1 inmunizados con una vacuna de ARNm basada en
SARS-CoV-2 S. Se necesita más investigación para determinar si la
administración en serie de vacunas basadas en dos proteínas S o RBD
relacionadas lejanamente en el orden inverso, es decir, cebado del clado
SARS-CoV-2 seguido de refuerzo del clado SARS-CoV-1, será producir un
nivel similar de anticuerpos neutralizantes de pan-sarbecovirus. Si
tiene éxito, esto sentará una base sólida para el desarrollo de una
vacuna Covid-19 de tercera generación para controlar las variantes
actuales y emergentes de preocupación, así como para prevenir futuras
pandemias de sarbecovirus.
Notas
1. Zhou P, Yang XL, Wang XG, et al. A pneumonia outbreak associated with a new coronavirus of probable bat origin. Nature 2020;579:270-273.
2. Peiris JS, Guan Y, Yuen KY. Severe acute respiratory syndrome. Nat Med 2004;10:12 Suppl:S88-S97.
3. Coronaviridae
Study Group of the International Committee on Taxonomy of Viruses. The
species severe acute respiratory syndrome-related coronavirus:
classifying 2019-nCoV and naming it SARS-CoV-2. Nat Microbiol 2020;5:536-544.
4. Starr TN, Greaney AJ, Hilton SK, et al. Deep mutational scanning of SARS-CoV-2 receptor binding domain reveals constraints on folding and ACE2 binding. Cell 2020;182(5):1295-1310.e20.
5. Anderson DE, Tan CW, Chia WN, et al. Lack of cross-neutralization by SARS patient sera towards SARS-CoV-2. Emerg Microbes Infect 2020;9:900-902.
6. Tan CW, Chia WN, Qin X,
et al. A SARS-CoV-2 surrogate virus neutralization test based on
antibody-mediated blockage of ACE2-spike protein-protein interaction.
Nat Biotechnol 2020;38:1073-1078.
7. Bossart KN, McEachern JA, Hickey AC, et al. Neutralization assays for differential henipavirus serology using Bio-Plex protein array systems. J Virol Methods 2007;142:29-40.
8. Perera RAPM, Ko R, Tsang OTY,
et al. Evaluation of a SARS-CoV-2 surrogate virus neutralization test
for detection of antibody in human, canine, cat, and hamster sera. J
Clin Microbiol 2021;59(2):e02504-e02520.
9. Davies NG, Abbott S, Barnard RC, et al. Estimated transmissibility and impact of SARS-CoV-2 lineage B.1.1.7 in England. Science 2021;372(6538):eabg3055-eabg3055.
10. Cele S, Gazy I, Jackson L, et al. Escape of SARS-CoV-2 501Y.V2 from neutralization by convalescent plasma. Nature 2021;593:142-146.
11. Singh J, Rahman SA, Ehtesham NZ, Hira S, Hasnain SE. SARS-CoV-2 variants of concern are emerging in India. Nat Med 2021;27:1131-1133.
12. Lam TTY, Jia N, Zhang YW, et al. Identifying SARS-CoV-2-related coronaviruses in Malayan pangolins. Nature 2020;583:282-285.
13. Ge XY, Li JL, Yang XL, et al. Isolation and characterization of a bat SARS-like coronavirus that uses the ACE2 receptor. Nature 2013;503:535-538.
14. Frutos R, Serra-Cobo J, Pinault L, Lopez Roig M, Devaux CA. Emergence of bat-related betacoronaviruses: hazard and risks. Front Microbiol 2021;12:591535-591535.
15. Fauci AS. The story behind COVID-19 vaccines. Science 2021;372:109-109.
16. Wang P, Nair MS, Liu L, et al. Antibody resistance of SARS-CoV-2 variants B.1.351 and B.1.1.7. Nature 2021;593:130-135.
17. Wang P, Casner RG, Nair MS, et al. Increased resistance of SARS-CoV-2 variant P.1 to antibody neutralization. Cell Host Microbe 2021;29(5):747-751.e4.
18. Jangra S, Ye C, Rathnasinghe R, et al. SARS-CoV-2 spike E484K mutation reduces antibody neutralisation. Lancet Microbe 2021;2(7):e283-e284.
19. Wu K, Choi A, Koch M, et al. Variant SARS-CoV-2 mRNA vaccines confer broad neutralization as primary or booster series in mice. April 13, 2021 (https://www.biorxiv.org/content/10.1101/2021.04.13.439482v1. opens in new tab). preprint.
20. Cohen J. The dream vaccine. Science 2021;372:227-231.
21. Hauser BM, Sangesland M, Lam EC, et al. Engineered receptor binding domain immunogens elicit pan-coronavirus neutralizing antibodies. December 8, 2020 (https://www.biorxiv.org/content/10.1101/2020.12.07.415216v1. opens in new tab). preprint.
22. Martinez DR, Schäfer A, Leist SR, et al. Chimeric spike mRNA vaccines protect against Sarbecovirus challenge in mice. May 11, 2021 (https://www.biorxiv.org/content/10.1101/2021.03.11.434872v2. opens in new tab). preprint.
23. Saunders KO, Lee E, Parks R, et al. Neutralizing antibody vaccine for pandemic and pre-emergent coronaviruses. Nature 2021;594:553-559.
24. Brouwer PJM, Caniels TG, van der Straten K, et al. Potent neutralizing antibodies from COVID-19 patients define multiple targets of vulnerability. Science 2020;369:643-650.
25. Starr TN, Greaney AJ, Addetia A, et al. Prospective mapping of viral mutations that escape antibodies used to treat COVID-19. Science 2021;371:850-854.
------
Con el apoyo de subvenciones de la Fundación Nacional de Investigación
de Singapur (NRF 2016 NRF-NSFC002-013) y el Consejo Nacional de
Investigación Médica (STPRG-FY19-001, COVID19RF-001, COVID19RF-003,
COVID19RF-008, MOH-000535 / MOH-OFYIRG19nov- 0002 y RIE2020
CCGSFPOR20002).
Los formularios de divulgación proporcionados por los autores están
disponibles con el texto completo de este artículo en NEJM.org.
Drs. Tan y Chia contribuyeron igualmente a este artículo.
Agradecemos a Xin Mei Ong, Pei San Kong, Jinyan Zhang, Wharton Chan,
Vivian Chen, Ying Ding, Xijian Qin y Nelson Wang por brindar apoyo
logístico, técnico y de reactivos y lectura crítica del manuscrito y de
todos los voluntarios, especialmente los sobrevivientes de la infección
por SARS-CoV-1, por su contribución a este estudio.
Afiliaciones de los autores
Del Programa de Enfermedades Infecciosas Emergentes de la Facultad de
Medicina de Duke – NUS (Universidad Nacional de Singapur) (C.-WT, W.-NC,
FZ, B.-LL, W.-RS, L.-FW), el National Centro de Enfermedades
Infecciosas (BEY, T.-LT, MI-CC, Y.-SL, DCL), Hospital Tan Tock Seng
(BEY, MI-CC, Y.-SL, DCL), Facultad de Medicina Lee Kong Chian,
Universidad Tecnológica de Nanyang (BEY, Y.-SL, DCL), Escuela de
Medicina Yong Loo Lin (Y.-SL, DCL) y Escuela de Salud Pública Saw Swee
Hock (Y.-SL), Universidad Nacional de Singapur y SingHealth Duke – NUS
Global Health Institute (L.-FW). Todo en Singapur.
Dirija las solicitudes de reimpresión al Dr. Wang en linfa.wang@duke-nus.edu.sg o al Dr. Lye en david_lye@ncid.sg.
Publicado en The New Enland Journal of Medicine el 18 de agosto de 2021.
https://www.nejm.org/doi/10.1056/NEJMoa2108453
Comentarios
Publicar un comentario